《GB 31659.7-2025 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 禽蛋中氯霉素殘留量的測定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》是由國家市場監(jiān)督管理總局、國家衛(wèi)生健康委員會以及農(nóng)業(yè)農(nóng)村部三大部委于2025年6月3日聯(lián)合發(fā)布的一項重要食品安全標(biāo)準(zhǔn)，并于2025年9月1日起正式實施。

氯霉素是一種廣譜抗生素，曾用于治療動物疾病，但由于其潛在危害，可能引起人類再生障礙性貧血和肝損傷，中國及許多國家已禁止氯霉素用于食品動物。農(nóng)業(yè)農(nóng)村部第250號公告明確將氯霉素列入《食品動物中禁止使用的藥品及其他化合物清單》。因此，監(jiān)測禽蛋等動物源性食品中的氯霉素殘留對于保障消費者食品安全至關(guān)重要。

一、適用范圍

GB 31659.7-2025標(biāo)準(zhǔn)明確規(guī)定適用于雞蛋、鴨蛋、鵝蛋、鵪鶉蛋等主要禽蛋品種中氯霉素殘留量的測定，同時標(biāo)準(zhǔn)也指出，對于其他禽蛋品種（如鴿蛋、鴕鳥蛋等）中氯霉素殘留量的檢測，可參照本標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行。

二、方法原理

本標(biāo)準(zhǔn)采用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（LC-MS/MS） 作為核心分析方法，其原理主要基于以下兩個過程：

（一）液相色譜分離：利用待測物在流動相（液體）和固定相（色譜柱填料）之間分配系數(shù)的差異，實現(xiàn)氯霉素與樣品基質(zhì)中其他干擾物質(zhì)的分離。氯霉素作為中等極性化合物，通常在反相C18色譜柱上進(jìn)行分離，采用甲醇-水或乙腈-水作為流動相進(jìn)行梯度洗脫；

（二）串聯(lián)質(zhì)譜檢測：經(jīng)過色譜分離后的氯霉素進(jìn)入質(zhì)譜儀，在離子源中形成帶電離子（氯霉素通常在負(fù)離子模式下檢測到去質(zhì)子化的分子[M-H]-），然后通過質(zhì)量分析器（三重四極桿）進(jìn)行選擇性檢測。采用多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）模式，通過選擇特定的母離子-子離子對進(jìn)行監(jiān)測，極大地提高了檢測的選擇性和靈敏度，有效減少了基質(zhì)干擾。

三、樣品制備與保存

（一）取樣：取適量鮮禽蛋，打破蛋殼，將蛋液（包括蛋白和蛋黃）充分混勻；

（二）儲存：制備好的樣品應(yīng)于-18℃以下冷凍保存，防止降解。樣品分析前應(yīng)恢復(fù)至室溫并再次混勻。

四、提取與凈化過程

樣品前處理包括提取和凈化兩個關(guān)鍵步驟，直接影響方法的準(zhǔn)確度和靈敏度：

（一）提取步驟：稱取5 g（精確至0.02 g）均勻試樣，加入內(nèi)標(biāo)工作液50 μL、乙腈5 mL和4%氯化鈉溶液5 mL，渦旋振蕩2 min，4000 r/min離心10 min，取上清液。殘渣重復(fù)提取一次，合并上清液。加入正己烷5 mL，渦旋振蕩1 min，2000 r/min離心10 min，棄去上層液（去除脂類干擾）。正己烷重復(fù)提取一次。然后加入水飽和的乙酸乙酯溶液5 mL，渦旋振蕩1 min，2000 r/min離心10 min，取上層液轉(zhuǎn)移至另一離心管中，重復(fù)提取一次，合并提取液，氮氣吹干。

（二）凈化步驟：使用C18固相萃取柱進(jìn)行凈化。SPE柱先用10 mL甲醇和10 mL水活化，然后取上述備用液全部上樣，棄去流出液。用6 mL水淋洗，抽干后，用3 mL 50%甲醇溶液洗脫，收集洗脫液。在洗脫液中加入水飽和乙酸乙酯溶液8 mL，渦旋振蕩1 min，2000 r/min離心5 min，取上清液，氮氣吹至近干，用50%甲醇溶液定容至1 mL，渦旋混勻，過0.22 μm濾膜后供LC-MS/MS分析。

五、儀器分析條件

標(biāo)準(zhǔn)中詳細(xì)規(guī)定了液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜的分析條件：

（一）液相色譜條件：

1.色譜柱：C18柱（5 μm，3.0×150 mm）；

2.流動相：甲醇-水或乙腈-水系統(tǒng)（具體比例標(biāo)準(zhǔn)中應(yīng)有詳細(xì)規(guī)定）；

3.柱溫：30℃；

4.流速：0.4 mL/min；

5.進(jìn)樣體積：2 μL。

（二）質(zhì)譜條件：

1.離子源：電噴霧離子源（ESI），負(fù)離子模式；

2.掃描方式：多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）；

3.離子源溫度：500℃；

4.離子噴霧電壓：-4500 V；

5.氣簾氣(CUR)：10 psi；

6.霧化氣(GS1)：55 psi；

7.輔助氣(GS2)：50 psi。

六、總結(jié)

隨著分析技術(shù)的不斷發(fā)展，未來禽蛋中氯霉素殘留檢測方法可能會進(jìn)一步向高通量、自動化和智能化方向發(fā)展，GB 31659.7-2025標(biāo)準(zhǔn)的發(fā)布實施為我國禽蛋產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)管提供了先進(jìn)的技術(shù)手段，對保障消費者健康、促進(jìn)禽蛋產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展具有重要意義。實驗室和檢測機(jī)構(gòu)應(yīng)積極準(zhǔn)備，確保在標(biāo)準(zhǔn)正式實施后能夠準(zhǔn)確有效地應(yīng)用該方法進(jìn)行禽蛋中氯霉素殘留的監(jiān)測工作。